雞胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗雞IGFBP-4抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的雞IGFBP-4與包被抗體結合,游離的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗雞IGFBP-4抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素??闺uIGFBP-4抗體與結合在包被抗體上的雞IGFBP-4結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。
加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,雞IGFBP-4濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中雞IGFBP-4的濃度。
雞胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)ELISA試劑盒試驗注意事項
(1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
(2)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
(3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
(4)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。(6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。