一、人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒規格參數
中文名稱:人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒
規格:48T 96T
種屬:人
品牌:臻科生物
檢測波長:450nm
所需樣本體積:保險量50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷,臨床的標本做課題是可以用的。
檢測目的:用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中皮膚蛋白(DPT)的含量。
檢測樣本種類:血清,血漿,尿液,組織勻漿,細胞上清液,腦脊液,灌洗液,糞便等樣本.
臻科供應屬種有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等
二、ELISA試劑盒組成
試劑盒組成 | 48 孔配置 | 96 孔配置 | 保存 |
說明書 | 1 份 | 1 份 |
|
封板膜 | 2 片(48) | 2 片(96) |
|
密封袋 | 1個 | 1個 |
|
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1 瓶 | 0.5ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 | 1.5ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 | 2-8℃保存 |
顯色劑A 液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B 液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
20 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 30ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
三、樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20 分鐘,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次
離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程
中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/
分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞
濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分
鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
四、注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
五、ELISA試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
六、ELISA試劑盒性能
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R 值為0.990 以上。
2.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3.重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。
4.保存條件及有效期:2-8℃冷藏,試劑盒保質期6個月。
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